超分辨顯微鏡（如STED、STORM等）對樣品清潔度要求極高，任何微小雜質(zhì)都可能干擾熒光信號或破壞納米級分辨率。以下是針對超分辨顯微鏡樣品的清潔流程及注意事項：

一、清潔步驟

初步清潔

去除浮塵：使用高壓氣罐（如SUNTO展途精密儀器清潔罐）或軟毛刷（如Datyson鏡頭刷）輕吹樣品表面，避免直接接觸。

干燥處理：若樣品含水分，用吸水紙（如化學生物實驗濾紙）輕輕吸干，或使用氮氣槍吹干。

深度清潔（針對頑固污漬）

選擇清潔劑：使用光學級異丙醇（與蒸餾水按1:1混合）或?qū)Ｓ苗R頭清洗液（如克拉瑪爾品牌）。

擦拭方法：用脫脂棉簽蘸取少量清潔劑，沿單一方向輕輕擦拭樣品表面，避免來回摩擦。

清洗與干燥

沖洗樣品：用去離子水沖洗樣品，確保無清潔劑殘留。

徹底干燥：用干燥器干燥樣品，或使用氮氣槍吹干，避免水分殘留。

二、清潔工具與試劑

工具：

高壓氣罐：用于吹去樣品表面浮塵。

軟毛刷：清除樣品表面灰塵，避免劃傷。

脫脂棉簽：配合清潔劑使用，擦拭頑固污漬。

擦鏡紙：用于擦拭樣品表面，確保無纖維殘留。

試劑：

光學級異丙醇：與蒸餾水混合使用，清潔效果好且不損傷樣品。

專用鏡頭清洗液：適用于高精度光學元件，無腐蝕性。

三、注意事項

防止損傷：

避免使用硬質(zhì)工具（如金屬鑷子）或粗糙布料，以防劃傷樣品表面。

擦拭時力度輕柔，避免對樣品結(jié)構(gòu)造成破壞。

化學試劑選擇：

禁用強酸、強堿或腐蝕性溶劑（如濃硫酸、氫氧化鈉），防止樣品結(jié)構(gòu)破壞或熒光標記失效。

使用清潔劑前，先在樣品邊緣測試，確保無不良反應(yīng)。

干燥處理：

清潔后需徹底干燥樣品，防止殘留水分影響顯微鏡真空環(huán)境或?qū)е聢D像模糊。

對于含熒光標記的樣品，避免長時間暴露在強光下，防止光漂白。

四、不同材質(zhì)樣品的清潔方法

生物樣品（含熒光標記）：

優(yōu)先使用壓縮空氣或軟毛刷清潔，避免液體接觸導致標記脫落。

若需液體清潔，使用緩沖液（如PBS）沖洗后，立即用氮氣吹干。

金屬/半導體樣品：

可用異丙醇擦拭，去除油污后吹干。

避免使用有機溶劑（如丙酮）浸泡，以防材料腐蝕。

高分子材料：

避免有機溶劑浸泡，以防材料膨脹或變形。

使用去離子水沖洗后，用干燥器干燥。

五、清潔后的處理

真空環(huán)境適應(yīng)：

對于需要真空條件的超分辨顯微鏡（如某些STED系統(tǒng)），清潔后需將樣品靜置于真空艙內(nèi)穩(wěn)定，避免氣體吸附干擾成像。

熒光標記保護：

若樣品含熒光染料，清潔后需避光保存，防止光漂白。

使用前檢查熒光標記穩(wěn)定性，確保成像質(zhì)量。

六、特殊場景處理

細胞樣品固定：

使用緩沖液（如PBS）清洗細胞樣品后，采用多聚甲醛固定，維持細胞形態(tài)。

固定后需用PBS沖洗多次，去除殘留固定劑。

納米結(jié)構(gòu)樣品：

清潔后需通過原子力顯微鏡（AFM）驗證表面粗糙度，確保符合超分辨成像要求。

避免使用可能引入污染的清潔工具或試劑。

通過遵循上述清潔步驟和注意事項，可以確保超分辨顯微鏡樣品表面潔凈無損，提高成像質(zhì)量和分辨率。